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重組大腸桿菌熱穩(wěn)定性過氧化氫酶的純化及性質(zhì)研究

來源:泰然健康網(wǎng) 時間:2024年12月28日 20:37

《微生物學報》 2002年03期

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重組大腸桿菌熱穩(wěn)定性過氧化氫酶的純化及性質(zhì)研究

王凡強,王正祥,邵蔚藍,劉吉泉,徐成勇,諸葛健   開通知網(wǎng)號

【摘要】:將產(chǎn)熱穩(wěn)定性過氧化氫酶的重組大腸桿菌培養(yǎng)后菌體破碎得到的粗酶液經(jīng)熱處理、硫酸銨分級沉淀、DEAE SephadexA 5 0離子交換層析、HiPrep 1 6 1 0Phenyl疏水作用層析、Su perdex2 0 0HR 1 0 3 0凝膠層析提純后得到電泳純的酶 ,比酶活達到 1 5 6 2 9U mg。此酶的最適溫度為 70℃ ,最適pH7 0 ,在 6 0℃保溫 6 0min酶活力基本不變 ,在pH3~ 8的范圍內(nèi)比較穩(wěn)定。此酶的Km 和Vmax分別為 7 75mmol L和 2 7 8mmol·min- 1·mg- 1。 1mmol L的Zn2 + 、Ba2 + 、Mn2 +可使該酶完全失活 ,KCN、NaN3 、Na2 S2 O4 、巰基乙醇對酶活力有抑制作用 ,5 0mmol L的EDTA不影響酶活性

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