多囊卵巢綜合征(PCOS)是一種女性常見的內(nèi)分泌疾病，流行病學(xué)調(diào)查顯示育齡期女性發(fā)病率為5%～18%。臨床上主要表現(xiàn)為月經(jīng)失調(diào)、不孕、肥胖、多毛、痤瘡，遠(yuǎn)期可能發(fā)生糖尿病、心血管疾病、子宮內(nèi)膜癌等，但其發(fā)病機(jī)制和分子基礎(chǔ)仍不明確，可能與遺傳因素、環(huán)境因素、生活方式等有關(guān)。

目前PCOS治療以干預(yù)生活方式、改善胰島素抵抗（IR）、調(diào)節(jié)月經(jīng)周期等為主，對(duì)于育齡期有生育需求的PCOS女性可使用促排卵藥物或采用輔助生殖技術(shù)（ART）等，但目前治療效果尚不理想，且接受ART的患者可能會(huì)出現(xiàn)卵母細(xì)胞質(zhì)量下降、卵巢過度刺激綜合征以及卵泡液代謝模式改變等問題。

PCOS患者妊娠結(jié)局表現(xiàn)為MⅡ期卵母細(xì)胞數(shù)、卵裂率、受精率、囊胚轉(zhuǎn)化率降低，而流產(chǎn)率增加。卵泡液是卵母細(xì)胞生長(zhǎng)、卵泡成熟和生殖細(xì)胞與體細(xì)胞相互聯(lián)系需要的復(fù)雜微環(huán)境，卵泡液中代謝物的改變會(huì)影響卵母細(xì)胞質(zhì)量及胚胎發(fā)育。

代謝組學(xué)是“組學(xué)”領(lǐng)域中的一個(gè)相對(duì)較新的子領(lǐng)域，它主要研究的是小分子代謝物的種類和濃度。近年來，代謝組學(xué)已被應(yīng)用于PCOS的診斷和治療，為PCOS的發(fā)病機(jī)制和生物標(biāo)志物的識(shí)別提供了新見解。本文就PCOS患者卵泡液代謝組學(xué)的研究進(jìn)展做一綜述。

一、卵泡液概述

卵泡液主要來自于顆粒細(xì)胞、膜細(xì)胞、卵母細(xì)胞產(chǎn)生的分泌物和通過鞘膜毛細(xì)血管轉(zhuǎn)移的血漿成分，由蛋白質(zhì)、類固醇和多糖組成，是卵母細(xì)胞的生長(zhǎng)、成熟和排出必不可少的微環(huán)境。研究表明，卵泡液中蛋白質(zhì)、甘油磷脂類和microRNA的水平與卵母細(xì)胞質(zhì)量和妊娠結(jié)局有關(guān)。

PCOS患者缺乏高質(zhì)量成熟卵母細(xì)胞可能是由于異常卵泡液代謝物和卵巢局部自分泌旁分泌調(diào)控機(jī)制所引起。與其他生物樣本相比，卵泡液的某些生化特征更容易影響卵母細(xì)胞質(zhì)量和胚胎發(fā)育。由于卵泡液是在取卵過程中收集的，所以可以作為一種非侵入性基質(zhì)，已成為研究PCOS的重要信息來源。

二、PCOS患者代謝組學(xué)特征

代謝組學(xué)是指用高通量檢測(cè)方法對(duì)特定條件和時(shí)間下所有小分子代謝物進(jìn)行定性定量分析，從而發(fā)現(xiàn)生物體對(duì)內(nèi)外環(huán)境變化做出的相應(yīng)應(yīng)答以及產(chǎn)生的整體代謝改變。與其他組學(xué)相比，代謝組學(xué)能更加真實(shí)地反映生物系統(tǒng)正在發(fā)生的事件。

PCOS是一種復(fù)雜和多系統(tǒng)的代謝性疾病，PCOS患者臨床上除有月經(jīng)稀發(fā)、排卵功能障礙外，還常伴有其他代謝異常表現(xiàn)，如高雄激素血癥、胰島素抵抗、血脂異常、糖代謝異常等。

目前已將代謝組學(xué)技術(shù)應(yīng)用于PCOS研究中，發(fā)現(xiàn)PCOS患者存在多條代謝途徑紊亂，如脂質(zhì)、氨基酸、碳水化合物、嘌呤代謝等。代謝組學(xué)研究表明PCOS患者通常有糖酵解途徑增強(qiáng)、脂質(zhì)代謝上調(diào)、特定氨基酸水平升高等改變，這些小分子代謝物的改變均會(huì)影響PCOS患者病情進(jìn)展。

通過核磁共振（NMR）、液相色譜-質(zhì)譜（LC-MS）和氣相色譜-質(zhì)譜（GC-MS）等技術(shù)檢測(cè)各類生物樣本代謝物，了解PCOS疾病狀態(tài)和發(fā)現(xiàn)新的生物標(biāo)記物以便優(yōu)化患者的妊娠結(jié)局。

三、PCOS患者卵泡液代謝物研究進(jìn)展概述

（一）葡萄糖

葡萄糖為卵母細(xì)胞的成熟、受精及胚胎發(fā)育過程提供能量，PCOS患者的代謝紊亂會(huì)引起卵泡液中葡萄糖水平的變化。PCOS患者卵巢糖代謝特點(diǎn)表現(xiàn)為卵母細(xì)胞的葡萄糖消耗和攝取降低、卵泡液糖酵解途徑增強(qiáng)、顆粒細(xì)胞內(nèi)葡萄糖代謝減弱。

卵丘細(xì)胞和卵母細(xì)胞共同參與葡萄糖的有氧氧化，此過程產(chǎn)生的能量在卵泡生長(zhǎng)發(fā)育過程中必不可少，而PCOS患者由于葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白（GLUT）向顆粒細(xì)胞轉(zhuǎn)位受阻導(dǎo)致葡萄糖利用率降低。

Castiglione等使用NMR波譜在PCOS患者卵泡液中檢測(cè)到葡萄糖含量增加，葡萄糖濃度與受精率和卵裂率呈負(fù)相關(guān)。Zhao等研究發(fā)現(xiàn)PCOS患者卵泡液中丙酮酸、琥珀酸、草酰乙酸、蘋果酸水平增高，乳酸和順式烏頭酸水平降低，其中琥珀酸增加使卵丘細(xì)胞中線粒體生成減少和炎癥反應(yīng)增強(qiáng)，最終導(dǎo)致卵母細(xì)胞生長(zhǎng)發(fā)育受損。

糖酵解及其產(chǎn)物在卵母細(xì)胞發(fā)育中發(fā)揮重要作用。乳酸是糖無氧酵解途徑的終產(chǎn)物，由丙酮酸轉(zhuǎn)化而成，二者關(guān)系密切。卵母細(xì)胞發(fā)育、受精以及著床過程需要大量能量，而PCOS患者由于GLUT表達(dá)異常和轉(zhuǎn)位受阻影響葡萄糖利用，因此提供給卵母細(xì)胞的能量主要來源于乳酸和丙酮酸。在典型PCOS患者卵泡液中，糖酵解產(chǎn)物乳酸含量顯著降低。

Zhang等發(fā)現(xiàn)丙酮酸在PCOS患者卵泡液中含量顯著下降，而其他研究得到了相反的結(jié)果。PCOS患者還存在卵丘細(xì)胞線粒體功能障礙、氧化還原電位失衡和氧化應(yīng)激增加，這些變化會(huì)阻礙線粒體新陳代謝，并增強(qiáng)糖酵解來補(bǔ)償能量供應(yīng)。在體外培養(yǎng)豬卵母細(xì)胞過程中，丙酮酸通過促進(jìn)人類合子基因組激活(ZGA)和降低氧化應(yīng)激水平來影響早期胚胎發(fā)育。

PCOS患者有丙酮酸含量降低和高氧化應(yīng)激水平，因此PCOS患者中的丙酮酸是否通過ZGA影響胚胎發(fā)育值得關(guān)注。目前PCOS糖代謝中的代謝物表現(xiàn)不一，糖代謝紊亂會(huì)對(duì)卵母細(xì)胞成熟和胚胎發(fā)育產(chǎn)生不良影響，但具體機(jī)制尚不明確，還需進(jìn)一步研究。

（二）脂類

1.脂肪酸類：

PCOS患者糖利用下降，脂質(zhì)代謝代償性上調(diào)，卵泡液中脂質(zhì)代謝物改變會(huì)影響卵母細(xì)胞成熟以及后續(xù)胚胎生長(zhǎng)發(fā)育。脂肪酸類代謝物種類眾多，其中包括游離脂肪酸（FAA）、硬脂酸、油酸、棕櫚酸、花生四烯酸等。

Ding等研究發(fā)現(xiàn)與正常女性組相比，PCOS患者中肥胖組、胰島素抵抗（IR）組和高雄激素血癥（HA）組的總FAA水平均顯著升高，其中FAA（14:1）水平升高會(huì)損害卵泡發(fā)育和卵母細(xì)胞成熟，從而影響優(yōu)質(zhì)胚胎率。

油酸和硬脂酸濃度也與卵母細(xì)胞發(fā)育能力有關(guān)，這可能是PCOS女性妊娠率降低的原因。Feng等發(fā)現(xiàn)非肥胖PCOS女性的硬脂酸水平降低；而其他研究顯示，PCOS患者硬脂酸水平上調(diào)。PCOS患者卵泡液中油酸水平顯著增加，且油酸與胚胎碎片指數(shù)呈正相關(guān)。油酸通過激活ERK1/2信號(hào)通路和抑制AMPK信號(hào)通路，誘導(dǎo)卵巢顆粒細(xì)胞產(chǎn)生炎癥反應(yīng)，這可能是PCOS的發(fā)生機(jī)制。

多項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)PCOS患者卵泡液中棕櫚酸水平上升，伴有IR的PCOS患者卵泡液中的棕櫚酸和十五烷酸含量高于非胰島素抵抗（NIR）的PCOS患者。Kobayashi等用動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證明在PCOS發(fā)展過程中，棕櫚酸通過ROS/p38和JNK信號(hào)通路誘導(dǎo)細(xì)胞色素P17A1和PAI-1基因表達(dá)上調(diào)以及雄激素生成途徑參與卵泡膜細(xì)胞自噬過程。

花生四烯酸及其衍生代謝物在生育能力和病理妊娠過程中均發(fā)揮著重要作用。有研究表明，PCOS患者卵泡液中花生四烯酸含量顯著增加，IR和HA通過環(huán)氧合酶-2（COX-2）途徑促進(jìn)花生四烯酸代謝。

前列腺素（PG）作為花生四烯酸的衍生代謝物在女性生育能力中起著關(guān)鍵作用。PCOS患者卵泡液中前列腺素E2（PGE2）、前列腺素F2α(PGF2α)、前列腺素J2（PGJ2）、前列腺素D2（PGD2）和血栓素B2（TXB2）顯著高于正常女性（P<0.05），其中PGE2、PGF2α、PGJ2和TXB2與獲卵數(shù)、MⅡ期卵母細(xì)胞數(shù)、雙原核卵母細(xì)胞數(shù)呈正相關(guān)，PGE2和PGJ2與優(yōu)質(zhì)胚胎率呈負(fù)相關(guān)。

Gongadashetti等發(fā)現(xiàn)PCOS流產(chǎn)患者卵泡液中8-異構(gòu)前列腺素（8-IP）顯著升高（P<0.05），8-IP可以作為PCOS婦女妊娠丟失的重要標(biāo)志物。

除以上脂肪酸外，在PCOS患者卵泡液中還發(fā)現(xiàn)了其他類別脂肪酸異常。研究表明伴有IR的PCOS患者卵泡液中芥子酸含量降低，說明IR會(huì)影響PCOS患者脂質(zhì)代謝。Castiglione等基于NMR發(fā)現(xiàn)β-羥基丁酸水平顯著降低。而另一項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)PCOS患者卵泡液中乙酰乙酸和β-羥基丁酸水平升高，且兩種代謝物與受精率呈正相關(guān)。

2.甘油磷脂類：

甘油磷脂是細(xì)胞膜主要成分和重要的信號(hào)分子，PCOS患者卵泡液中一系列甘油磷脂類均發(fā)生了顯著變化。

Ban等發(fā)現(xiàn)正常體重PCOS患者卵泡液中盡管不同結(jié)構(gòu)式的磷脂酰乙醇胺（PE）和磷脂酰肌醇（PI）含量增高，但總PE和總PI水平?jīng)]有顯著差異。

Liu等發(fā)現(xiàn)PCOS患者磷脂酰膽堿(PC）水平顯著降低，卵泡液中PC含量與LH/FSH比值呈正相關(guān)，人卵丘細(xì)胞中PC含量與LH有關(guān)，這意味著PC可能通過LH影響卵母細(xì)胞發(fā)育。

Ding等研究表明PCOS患者卵泡液中溶血磷脂酰甘油（LPG）下降，其中LPG(18:0)含量與優(yōu)質(zhì)胚胎率呈正相關(guān)。與對(duì)照組相比，PCOS患者的溶血磷脂酸（LPA）顯著降低，其中LPA[18:1(9Z)/0:0]是預(yù)測(cè)PCOS患者活產(chǎn)率和分娩率的良好指標(biāo)。LPA可通過激活ERK1/2通路改善未成熟卵母細(xì)胞體外成熟（IVM）中的卵母細(xì)胞質(zhì)量。

3.鞘脂類：

鞘脂及其代謝產(chǎn)物是一類重要的信號(hào)分子，通過調(diào)節(jié)能量代謝、細(xì)胞增殖、細(xì)胞凋亡和類固醇激素合成來維持卵泡和卵母細(xì)胞生長(zhǎng)發(fā)育。神經(jīng)酰胺（Cer）是通過鞘磷脂水解或更復(fù)雜的鞘脂代謝生成的。

有研究發(fā)現(xiàn)Cer在PCOS患者卵泡液中增加，其中伴有IR和肥胖PCOS患者的Cer水平顯著高于正常女性（P<0.05），而在伴有HA的PCOS女性中沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，表明Cer與肥胖和IR有關(guān)，而不受睪酮影響，此研究還發(fā)現(xiàn)Cer(36:1)、Cer(38:1)、Cer(38:2)、Cer(40:2)均與優(yōu)質(zhì)胚胎率呈負(fù)相關(guān)。

其他研究也表明在PCOS患者體外受精（IVF）過程中，鞘脂代謝和鞘磷脂生物合成異常與雙原核（2PN）受精率密切相關(guān)，并認(rèn)為鞘脂通過影響促性腺激素分泌來改變卵母細(xì)胞的發(fā)育潛力。

4.固醇脂類：

類固醇主要包括固醇類、膽汁酸和類固醇激素等，不同的類固醇有不同的作用，卵泡液中類固醇在調(diào)節(jié)卵泡生成和卵母細(xì)胞成熟方面起著至關(guān)重要的作用。

Chen等發(fā)現(xiàn)PCOS女性卵泡液中7β-羥基膽固醇(7β-OHCH)含量降低。7β-OHCH水平異?？烧T發(fā)氧化應(yīng)激和脂肪酸代謝功能障礙，從而影響卵母細(xì)胞生長(zhǎng)。

Yang等研究發(fā)現(xiàn)在PCOS患者卵泡液中，甘膽酸（GC3A）、?；悄懰幔═CA）、甘氨鵝脫氧膽酸（GCDCA）和鵝去氧膽酸-3-β-d-葡萄糖醛（CDCA-3Gln）水平上升，并發(fā)現(xiàn)GCDCA與FSH和LH呈正相關(guān)，CDCA-3Gln的水平也隨著竇卵泡計(jì)數(shù)的增加而上升，表明膽汁酸代謝與排卵障礙和卵巢儲(chǔ)備有關(guān)。

肝受體同系物-1(LRH-1)作為膽汁酸代謝的重要組成部分，在性腺發(fā)育和排卵過程中發(fā)揮作用，有研究發(fā)現(xiàn)PCOS患者顆粒細(xì)胞中LRH-1表達(dá)增高。所有證據(jù)表明，膽汁酸代謝在PCOS患者的卵泡發(fā)育和卵巢功能中發(fā)揮重要作用。PCOS患者通常有類固醇激素代謝紊亂，其中HA在PCOS的發(fā)病機(jī)制中起核心作用。與正常女性比較，PCOS患者的卵泡液常表現(xiàn)為雄激素升高，而孕酮水平降低。HA會(huì)嚴(yán)重影響PCOS患者的體征和代謝，也是引起PCOS患者排卵障礙的主要原因，PCOS女性卵泡液中過高的雄激素主要來源于卵巢。

Ge等研究表明，與非高雄激素血癥（NHA）的PCOS女性比較，伴有HA的PCOS女性卵泡液中雄烯二酮、總睪酮、二氫睪酮水平升高（P<0.05），3β-羥基類固醇脫氫酶Ⅱ型（3β-HSD2）和17β-羥類固醇脫氫酶3型(17β-HSD3)活性增強(qiáng)而5α-還原酶活性降低（P<0.05），并且發(fā)現(xiàn)LH/FSH比值與類固醇水平和酶活性具有相關(guān)性。

Yu等檢測(cè)到多種類固醇激素，與對(duì)照組相比，PCOS患者卵泡液中雌三醇、雌二醇和孕烯醇酮水平顯著升高而孕酮水平降低，外泌體中細(xì)胞色素P450家族成員11A1（CYP11A1）、細(xì)胞色素P450家族成員19A1（CYP19A1）和17-β-羥基類固醇脫氫酶1（HSD17B1）的mRNA水平與類固醇激素變化有相關(guān)性，其中CYP11A1和HSD17B1表達(dá)水平與優(yōu)質(zhì)胚胎率呈負(fù)相關(guān)，這表明類固醇激素通過改變外泌體中HSD17B1、CYP19A1和CYP11A1的表達(dá)影響PCOS患者的卵泡發(fā)育。

（三）氨基酸

1.芳香族氨基酸類：

卵泡液中氨基酸變化會(huì)影響代謝途徑中的重要信號(hào)分子、受體和酶活性，進(jìn)而影響后續(xù)卵母細(xì)胞質(zhì)量以及受精過程。Hou等研究發(fā)現(xiàn)在非肥胖和NIR的PCOS患者卵泡液中L-色氨酸和L-酪氨酸含量增加且與血清睪酮和雄烯二酮水平呈正相關(guān)，認(rèn)為氨基酸代謝可以彌補(bǔ)TCA功能的不足。PCOS患者可通過激活色氨酸-犬尿氨酸途徑引起中樞神經(jīng)系統(tǒng)的炎癥反應(yīng)并改變神經(jīng)內(nèi)分泌功能。此外，Sun等發(fā)現(xiàn)PCOS女性卵泡中苯丙氨酸上調(diào)；苯丙氨酸代謝不僅對(duì)卵母細(xì)胞的生長(zhǎng)發(fā)育至關(guān)重要，還與女性排卵功能障礙有關(guān)。

2.支鏈氨基酸（BCAA）類：

卵泡液中BCAA改變會(huì)影響卵巢局部代謝，進(jìn)而影響妊娠結(jié)局。多項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)PCOS組卵泡液中BCAA水平增，但也有研究檢測(cè)到BCAA水平降低。Zhang等研究表明優(yōu)質(zhì)胚胎率與亮氨酸、異亮氨酸、酪氨酸呈顯著負(fù)相關(guān)。BCAA代謝與胰島素分泌和胰島素敏感性有關(guān)，與NIR的PCOS組相比，伴有IR的PCOS患者的亮氨酸、纈氨酸水平更高。

3.肉堿：

肉堿是一種特殊氨基酸，在PCOS的發(fā)病機(jī)制以及卵巢生理功能中發(fā)揮重要作用，肉堿也常用于PCOS的治療。PCOS患者卵泡液中各類肉堿變化趨勢(shì)不同，有研究發(fā)現(xiàn)L-棕櫚酰肉堿、亞油酰肉堿、反式十六碳-2-烯基肉堿下調(diào)，而3-羥基壬酰肉堿則上調(diào)。肉堿通過將脂肪輸送到線粒體來加速脂肪燃燒和分解，補(bǔ)充肉堿可以調(diào)節(jié)PCOS患者體重進(jìn)而有助于PCOS的治療。此外，也有研究表明，左旋肉堿和二甲雙胍共同治療可以改善枸櫞酸克羅米芬耐藥的PCOS患者的生育能力，并且在IR和脂質(zhì)代謝方面具有協(xié)同作用。

4.其他類別氨基酸：

除以上氨基酸外，其他種類氨基酸也與PCOS有重要關(guān)聯(lián)。Yu等研究發(fā)現(xiàn)與正常對(duì)照組相比，痰濕阻滯型PCOS患者卵泡液中L-谷氨酸、N-乙?；?L-天冬氨酸、D-脯氨酸上調(diào)。有研究表明，PCOS患者卵泡液中蘇氨酸下調(diào)，并發(fā)現(xiàn)丙氨酸和天冬氨酸與體質(zhì)量指數(shù)呈正相關(guān)，獲卵數(shù)與天冬氨酸和谷氨酸呈正相關(guān)。Zhang等發(fā)現(xiàn)在PCOS組中谷氨酰胺和丙氨酸顯著降低，且谷氨酰胺與優(yōu)質(zhì)胚胎率呈正相關(guān)。因此，氨基酸的研究為提高PCOS女性不良卵母細(xì)胞質(zhì)量提供新思路。

四、卵泡液代謝組學(xué)在PCOS療效評(píng)價(jià)方面的應(yīng)用

卵泡液代謝組學(xué)既能發(fā)現(xiàn)PCOS潛在的生物標(biāo)志物，又能預(yù)測(cè)胚胎發(fā)育潛能，而且還可以應(yīng)用于PCOS的療效評(píng)價(jià)。

一項(xiàng)基于UHPLC-MS的非靶向代謝組學(xué)研究評(píng)價(jià)了穴位貼敷治療痰濕型PCOS患者的臨床療效，結(jié)果表明治療后假尿嘧啶核苷、苯酚、2-氧代己二酸、9R、10S-EpOME、DL-乳酸、煙酰胺、DL-3-吲哚乳酸水平均降低，臨床上表現(xiàn)為Gn天數(shù)變少、可利用胚胎數(shù)增多，提示該治療方法能有效改善痰濕型PCOS患者的臨床癥狀和IVF治療結(jié)局。

Ersahin等研究表明枸櫞酸氯米芬治療的無排卵性PCOS患者卵泡液中乳酸水平增加而膽堿水平降低，并發(fā)現(xiàn)枸櫞酸氯米芬治療可能使PCOS患者卵丘卵母細(xì)胞復(fù)合體受損繼而導(dǎo)致膽堿代謝發(fā)生改變，從而改善了PCOS患者的臨床癥狀和妊娠結(jié)局。目前代謝組學(xué)已應(yīng)用于PCOS的療效評(píng)價(jià)，為PCOS的治療提供了新的見解。

五、小結(jié)

PCOS已是一種全球性疾病，導(dǎo)致許多婦女不孕，但其病因復(fù)雜，目前尚未找到根治方法。PCOS患者常表現(xiàn)為內(nèi)分泌代謝紊亂，因此研究PCOS相關(guān)代謝因子至關(guān)重要。進(jìn)行IVF-ET的PCOS患者妊娠結(jié)局不理想，表現(xiàn)為受精率、著床率降低等。卵泡液作為卵母細(xì)胞生長(zhǎng)的微環(huán)境，其代謝物的改變必然會(huì)影響卵母細(xì)胞發(fā)育以及受精的能力，但明確的關(guān)聯(lián)性以及具體機(jī)制尚不清楚。

近年來，隨著代謝組學(xué)的不斷發(fā)展和對(duì)PCOS患者卵泡液的深入研究，已發(fā)現(xiàn)了不同代謝途徑中的多種代謝物。從小分子水平探討PCOS的發(fā)病機(jī)制和卵母細(xì)胞的代謝途徑，可以提高卵母細(xì)胞和胚胎質(zhì)量，也為臨床制定PCOS精準(zhǔn)診療策略提供了新的思路和理論依據(jù)。

文章來源：余佳月，尹太郎，楊菁.多囊卵巢綜合征患者卵泡液代謝組學(xué)的研究進(jìn)展[J].生殖醫(yī)學(xué)雜志，2024,33(2):265-270.

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