本發(fā)明涉及中藥鑒別領(lǐng)域，特別是一種番石榴葉炮制品的鑒別方法。

背景技術(shù)

番石榴葉為桃金娘科植物番石榴(psidiumguajaval.)的葉。在福建、中國(guó)臺(tái)灣、廣東、廣西、四川和云南等地均有分布或栽培。具有燥濕健脾，清熱解毒之功效。常用于治療瀉痢腹痛，食積腹脹，齒齦腫痛，風(fēng)濕痹痛，濕疹臁瘡，疔瘡腫毒，跌打腫痛，外傷出血，蛇蟲(chóng)咬傷。

番石榴葉通過(guò)炮制后，加強(qiáng)了藥物效用，減除毒性或副作用，便于貯藏和便于服用。

關(guān)于番石榴葉的生品的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)已有記載，但是番石榴葉炮制品的檢測(cè)方法還沒(méi)有記載。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的一個(gè)目的是克服現(xiàn)有技術(shù)的缺陷，提供一種簡(jiǎn)單方便檢測(cè)番石榴葉炮制品的方法，可有效解決番石榴葉炮制品的鑒定問(wèn)題。

為了實(shí)現(xiàn)根據(jù)本發(fā)明的這些目的和其它優(yōu)點(diǎn)，提供了一種番石榴葉炮制品的鑒別方法，包括以下步驟：

步驟一、分別制備番石榴葉炮制品對(duì)照藥材溶液和供試品溶液；

步驟二、將番石榴葉炮制品對(duì)照藥材溶液和供試品溶液均按照薄層色譜法試驗(yàn)，得番石榴葉炮制品對(duì)照藥材薄層色譜和供試品溶液薄層色譜；

步驟三、對(duì)比番石榴葉炮制品對(duì)照藥材薄層色譜和供試品薄層色譜。

優(yōu)選的是，番石榴葉炮制品對(duì)照藥材溶液的制備方法如下：

稱定番石榴葉炮制品對(duì)照藥材1-3g，碾碎成粉末，粉末過(guò)篩，倒入帶塞的容器中，并加入95％乙醇溶液30-80ml，經(jīng)超聲處理0.5-1h，過(guò)濾，濾液蒸干，殘?jiān)铀芙猓檬兔烟崛?-3次，每次5-20ml，合并石油醚提取液，蒸干，加入甲醇1-3ml，作為番石榴葉炮制品對(duì)照藥材溶液。

優(yōu)選的是，供試品溶液制備方法如下：

稱定供試品1-3g，碾碎成粉末，粉末過(guò)篩，倒入帶塞的容器中，并加入95％乙醇溶液30-80ml，經(jīng)超聲處理0.5-1h，過(guò)濾，濾液蒸干，殘?jiān)铀芙?，用石油醚提?-3次，每次5-20ml，合并石油醚提取液，蒸干，加入甲醇1-3ml，作為供試品溶液。

優(yōu)選的是，薄層色譜法試驗(yàn)采用的薄層色譜展開(kāi)板為硅膠g薄層板。

優(yōu)選的是，薄層色譜法試驗(yàn)所采用的展開(kāi)劑為石油醚-三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇的混合溶液，其中石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇的體積比為10-30:10:1:1，石油醚選擇沸程為60℃-90℃的產(chǎn)品。

優(yōu)選的是，薄層色譜法試驗(yàn)中，將展開(kāi)后的薄層板晾干，并浸泡10％硫酸乙醇溶液，再加熱顯色至斑點(diǎn)清晰。

優(yōu)選的是，薄層色譜法試驗(yàn)中進(jìn)行點(diǎn)樣時(shí)，供試品溶液及番石榴葉炮制品對(duì)照藥材溶液需要點(diǎn)在同一塊薄層板上。

優(yōu)選的是，進(jìn)行薄層色譜法試驗(yàn)操作時(shí)的環(huán)境溫度為10-60℃，相對(duì)濕度為45％-70％。

優(yōu)選的是，硅膠g薄層板在使用前經(jīng)過(guò)90-105℃的烘干活化處理。

本發(fā)明至少包括以下有益效果：本發(fā)明方法操作簡(jiǎn)便、快速、穩(wěn)定可靠、準(zhǔn)確性強(qiáng)、薄層色譜中各斑點(diǎn)分離效果好、有效用于番石榴葉炮制品的鑒定，為番石榴葉炮制品的鑒定提供技術(shù)保障，具有良好的經(jīng)濟(jì)和社會(huì)效益。

本發(fā)明的其它優(yōu)點(diǎn)、目標(biāo)和特征將部分通過(guò)下面的說(shuō)明體現(xiàn)，部分還將通過(guò)對(duì)本發(fā)明的研究和實(shí)踐而為本領(lǐng)域的技術(shù)人員所理解。

附圖說(shuō)明

圖1為本發(fā)明的番石榴葉炮制品對(duì)照藥材和11份不同批次供試品的薄層色譜圖，1為番石榴葉炮制品對(duì)照藥材，2-12為11份不同批次供試品；

圖2為本發(fā)明所述環(huán)境溫度為10℃，相對(duì)濕度為70％的薄層色譜圖，1為番石榴葉炮制品對(duì)照藥材，2為供試品；

圖3為本發(fā)明所述環(huán)境溫度為60℃，相對(duì)濕度為45％的薄層色譜圖，1為番石榴葉炮制品對(duì)照藥材，2為供試品；

圖4為本發(fā)明所述薄層色譜法試驗(yàn)中展開(kāi)劑為石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇體積比為30：10：1：1時(shí)的薄層色譜圖，1為番石榴葉炮制品對(duì)照藥材，2為供試品；

圖5為本發(fā)明所述薄層色譜法試驗(yàn)中展開(kāi)劑為石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇體積比為10：10：1：1時(shí)的薄層色譜圖，1為番石榴葉炮制品對(duì)照藥材，2為供試品；

圖6為本發(fā)明所述薄層色譜法試驗(yàn)中實(shí)施例6，僅用石油醚提取后，進(jìn)行薄層色譜分寫的薄層色譜圖，1為番石榴葉生品，2為番石榴葉炮制品；

圖7為本發(fā)明所述薄層色譜法試驗(yàn)中實(shí)施例7，不提取，直接用甲醇溶解后點(diǎn)樣，進(jìn)行薄層色譜分寫的薄層色譜圖，1為番石榴葉生品，2為番石榴葉炮制品。

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合附圖對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步的詳細(xì)說(shuō)明，以令本領(lǐng)域技術(shù)人員參照說(shuō)明書(shū)文字能夠據(jù)以實(shí)施。

<實(shí)施例1>

番石榴葉炮制品對(duì)照藥材溶液的制備方法如下：

稱定番石榴葉炮制品對(duì)照藥材2g，碾碎成粉末，粉末過(guò)篩，倒入帶塞的容器中，并加入95％乙醇溶液50ml，經(jīng)超聲處理0.5h，過(guò)濾，濾液蒸干，殘?jiān)铀芙?，用石油醚提?次，每次10ml，合并石油醚提取液，蒸干，加入甲醇2ml，作為番石榴葉炮制品對(duì)照藥材溶液。

供試品溶液制備方法如下：

稱定供試品2g，碾碎成粉末，粉末過(guò)篩，倒入帶塞的容器中，并加入95％乙醇溶液50ml，經(jīng)超聲處理0.5h，過(guò)濾，濾液蒸干，殘?jiān)铀芙猓檬兔烟崛?次，每次10ml，合并石油醚提取液，蒸干，加入甲醇2ml，作為供試品溶液。

薄層色譜法試驗(yàn):

用毛細(xì)管吸取番石榴葉炮制品對(duì)照藥材溶液和供試品溶液兩種溶液各1-2μl，分別點(diǎn)于同一硅膠g薄層板上，以石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇體積比20:10:1:1為展開(kāi)劑，點(diǎn)樣后，把展開(kāi)劑倒進(jìn)展開(kāi)缸預(yù)飽和后展開(kāi)，取出，晾干，浸泡于10％硫酸乙醇溶液1-2秒，再把硅膠g薄層板加熱至斑點(diǎn)清晰。供試品色譜中，在與番石榴葉炮制品對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)，從而實(shí)現(xiàn)利用薄層色譜對(duì)番石榴葉炮制品的鑒定，薄層色譜圖見(jiàn)附圖1。

<實(shí)施例2>

番石榴葉炮制品對(duì)照藥材溶液的制備方法如下：

稱定番石榴葉炮制品對(duì)照藥材2g，碾碎成粉末，粉末過(guò)篩，倒入帶塞的容器中，并加入95％乙醇溶液50ml，經(jīng)超聲處理0.5h，過(guò)濾，濾液蒸干，殘?jiān)铀芙?，用石油醚提?次，每次10ml，合并石油醚提取液，蒸干，加入甲醇2ml，作為番石榴葉炮制品對(duì)照藥材溶液。

供試品溶液制備方法如下：

稱定供試品2g，碾碎成粉末，粉末過(guò)篩，倒入帶塞的容器中，并加入95％乙醇溶液50ml，經(jīng)超聲處理0.5h，過(guò)濾，濾液蒸干，殘?jiān)铀芙?，用石油醚提?次，每次10ml，合并石油醚提取液，蒸干，加入甲醇2ml，作為供試品溶液。

薄層色譜法試驗(yàn):

用毛細(xì)管吸取番石榴葉炮制品對(duì)照藥材溶液和供試品溶液兩種溶液各1-2μl，分別點(diǎn)于同一硅膠g薄層板上，在環(huán)境溫度為10℃，相對(duì)濕度為70％條件下，以石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇體積比20:10:1:1為展開(kāi)劑，點(diǎn)樣后，把展開(kāi)劑倒進(jìn)展開(kāi)缸預(yù)飽和后展開(kāi)，取出，晾干，浸泡于10％硫酸乙醇溶液1-2秒，再把硅膠g薄層板加熱至斑點(diǎn)清晰。供試品色譜中，在與番石榴葉炮制品對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)，從而實(shí)現(xiàn)利用薄層色譜對(duì)番石榴葉炮制品的鑒定，薄層色譜圖見(jiàn)附圖2。

<實(shí)施例3>

番石榴葉炮制品對(duì)照藥材溶液的制備方法如下：

稱定番石榴葉炮制品對(duì)照藥材2g，碾碎成粉末，粉末過(guò)篩，倒入帶塞的容器中，并加入95％乙醇溶液50ml，經(jīng)超聲處理0.5h，過(guò)濾，濾液蒸干，殘?jiān)铀芙猓檬兔烟崛?次，每次10ml，合并石油醚提取液，蒸干，加入甲醇2ml，作為番石榴葉炮制品對(duì)照藥材溶液。

供試品溶液制備方法如下：

稱定供試品2g，碾碎成粉末，粉末過(guò)篩，倒入帶塞的容器中，并加入95％乙醇溶液50ml，經(jīng)超聲處理0.5h，過(guò)濾，濾液蒸干，殘?jiān)铀芙?，用石油醚提?次，每次10ml，合并石油醚提取液，蒸干，加入甲醇2ml，作為供試品溶液。

薄層色譜法試驗(yàn):

用毛細(xì)管吸取番石榴葉炮制品對(duì)照藥材溶液和供試品溶液兩種溶液各1-2μl，分別點(diǎn)于同一硅膠g薄層板上，在環(huán)境溫度為60℃，相對(duì)濕度為45％條件下，以石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇體積比20:10:1:1為展開(kāi)劑，點(diǎn)樣后，把展開(kāi)劑倒進(jìn)展開(kāi)缸預(yù)飽和后展開(kāi)，取出，晾干，浸泡于10％硫酸乙醇溶液1-2秒，再把硅膠g薄層板加熱至斑點(diǎn)清晰。供試品色譜中，在與番石榴葉炮制品對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)，從而實(shí)現(xiàn)利用薄層色譜對(duì)番石榴葉炮制品的鑒定，薄層色譜圖見(jiàn)附圖3。

根據(jù)上述實(shí)施例可以得出，本發(fā)明的番石榴葉炮制品的鑒別方法具有很廣的濕度和溫度耐受性，穩(wěn)定可靠。

<實(shí)施例4>

番石榴葉炮制品對(duì)照藥材溶液的制備方法如下：

稱定番石榴葉炮制品對(duì)照藥材2g，碾碎成粉末，粉末過(guò)篩，倒入帶塞的容器中，并加入95％乙醇溶液50ml，經(jīng)超聲處理0.5h，過(guò)濾，濾液蒸干，殘?jiān)铀芙?，用石油醚提?次，每次10ml，合并石油醚提取液，蒸干，加入甲醇2ml，作為番石榴葉炮制品對(duì)照藥材溶液。

供試品溶液制備方法如下：

稱定供試品2g，碾碎成粉末，粉末過(guò)篩，倒入帶塞的容器中，并加入95％乙醇溶液50ml，經(jīng)超聲處理0.5h，過(guò)濾，濾液蒸干，殘?jiān)铀芙?，用石油醚提?次，每次10ml，合并石油醚提取液，蒸干，加入甲醇2ml，作為供試品溶液。

薄層色譜法試驗(yàn):

用毛細(xì)管吸取番石榴葉炮制品對(duì)照藥材溶液和供試品溶液兩種溶液各1-2μl，分別點(diǎn)于同一硅膠g薄層板上，以石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇體積比30:10:1:1為展開(kāi)劑，點(diǎn)樣后，把展開(kāi)劑倒進(jìn)展開(kāi)缸預(yù)飽和后展開(kāi)，取出，晾干，浸泡于10％硫酸乙醇溶液1-2秒，再把硅膠g薄層板加熱至斑點(diǎn)清晰。供試品色譜中，在與番石榴葉炮制品對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)，從而實(shí)現(xiàn)利用薄層色譜對(duì)番石榴葉炮制品的鑒定，薄層色譜圖見(jiàn)附圖4。

<實(shí)施例5>

番石榴葉炮制品對(duì)照藥材溶液的制備方法如下：

稱定番石榴葉炮制品對(duì)照藥材2g，碾碎成粉末，粉末過(guò)篩，倒入帶塞的容器中，并加入95％乙醇溶液50ml，經(jīng)超聲處理0.5h，過(guò)濾，濾液蒸干，殘?jiān)铀芙?，用石油醚提?次，每次10ml，合并石油醚提取液，蒸干，加入甲醇2ml，作為番石榴葉炮制品對(duì)照藥材溶液。

供試品溶液制備方法如下：

稱定供試品2g，碾碎成粉末，粉末過(guò)篩，倒入帶塞的容器中，并加入95％乙醇溶液50ml，經(jīng)超聲處理0.5h，過(guò)濾，濾液蒸干，殘?jiān)铀芙?，用石油醚提?次，每次10ml，合并石油醚提取液，蒸干，加入甲醇2ml，作為供試品溶液。

薄層色譜法試驗(yàn):

用毛細(xì)管吸取番石榴葉炮制品對(duì)照藥材溶液和供試品溶液兩種溶液各1-2μl，分別點(diǎn)于同一硅膠g薄層板上，以石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇體積比10:10:1:1為展開(kāi)劑，點(diǎn)樣后，把展開(kāi)劑倒進(jìn)展開(kāi)缸預(yù)飽和后展開(kāi)，取出，晾干，浸泡于10％硫酸乙醇溶液1-2秒，再把硅膠g薄層板加熱至斑點(diǎn)清晰。供試品色譜中，在與番石榴葉炮制品對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)，從而實(shí)現(xiàn)利用薄層色譜對(duì)番石榴葉炮制品的鑒定，薄層色譜圖見(jiàn)附圖5。

根據(jù)上述實(shí)施例可以得出，本發(fā)明的番石榴葉炮制品的鑒別方法再展開(kāi)劑的選取上有很廣泛的耐受性，穩(wěn)定可靠。

<實(shí)施例6>

番石榴葉生品溶液制備方法如下：

稱定番石榴葉生品2g，碾碎，過(guò)篩，倒入帶塞的容器中，并加入95％乙醇溶液50ml，經(jīng)超聲處理0.5h，過(guò)濾，濾液蒸干，殘?jiān)铀芙?，用石油醚提?次，每次10ml，合并石油醚提取液，濃縮至2ml，作為生品溶液。

番石榴葉炮制品溶液的制備方法如下：

稱定番石榴葉炮制品2g，碾碎成粉末，過(guò)篩，倒入帶塞的容器中，并加入95％乙醇溶液50ml，經(jīng)超聲處理0.5h，過(guò)濾，濾液蒸干，殘?jiān)铀芙?，用石油醚提?次，每次10ml，合并石油醚提取液，濃縮至2ml，作為番石榴葉炮制品對(duì)照藥材溶液。

薄層色譜法試驗(yàn):

用毛細(xì)管吸取番石榴生品溶液和番石榴葉炮制品溶液兩種溶液各1-2μl，分別點(diǎn)于同一硅膠g薄層板上，以石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇體積比20:10:1:1為展開(kāi)劑，點(diǎn)樣后，把展開(kāi)劑倒進(jìn)展開(kāi)缸預(yù)飽和后展開(kāi)，取出，晾干，浸泡于10％硫酸乙醇溶液1-2秒，再把硅膠g薄層板加熱至斑點(diǎn)清晰。

在對(duì)比色譜中，番石榴葉生品色譜與番石榴葉炮制品色譜在相應(yīng)的位置上，斑點(diǎn)有明顯差別，得出番石榴葉生品與番石榴葉炮制品在化學(xué)成分上有明顯不同，薄層色譜圖見(jiàn)附圖6。

<實(shí)施例7>

番石榴葉生品溶液制備方法如下：

稱定番石榴葉生品2g，碾碎，過(guò)篩，倒入帶塞的容器中，并加入95％乙醇溶液50ml，經(jīng)超聲處理0.5h，過(guò)濾，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml溶解，作為生品溶液。

番石榴葉炮制品溶液的制備方法如下：

稱定番石榴葉炮制品2g，碾碎成粉末，過(guò)篩，倒入帶塞的容器中，并加入95％乙醇溶液50ml，經(jīng)超聲處理0.5h，過(guò)濾，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml溶解，作為番石榴葉炮制品溶液。

薄層色譜法試驗(yàn):

用毛細(xì)管吸取番石榴葉炮制品對(duì)照藥材溶液和供試品溶液兩種溶液各1-2μl，分別點(diǎn)于同一硅膠g薄層板上，以石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇體積比20:10:1:1為展開(kāi)劑，點(diǎn)樣后，把展開(kāi)劑倒進(jìn)展開(kāi)缸預(yù)飽和后展開(kāi)，取出，晾干，浸泡于10％硫酸乙醇溶液1-2秒，再把硅膠g薄層板加熱至斑點(diǎn)清晰。

在對(duì)比色譜中，明顯可以看出斑點(diǎn)很多，分離不開(kāi)，得出采用石油醚進(jìn)行提取后再進(jìn)行薄層色譜分析是有必要的，薄層色譜圖見(jiàn)附圖7。

由上述可知，本發(fā)明提供了一種利用薄層色譜法鑒定番石榴葉炮制品的方法，該方法操作簡(jiǎn)便、快速、專屬性強(qiáng)、薄層色譜中各斑點(diǎn)分離效果良好，可有效用于番石榴葉炮制品的質(zhì)量鑒定。

另外發(fā)明人針對(duì)番石榴葉生品也進(jìn)行了薄層色譜分析研究，對(duì)照番石榴葉炮制品，發(fā)現(xiàn)番石榴葉生品和番石榴葉炮制品再化學(xué)成份上有明顯不同，番石榴葉生品已有質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，因此針對(duì)番石榴葉炮制品的檢測(cè)方法進(jìn)行了研究。

盡管本發(fā)明的實(shí)施方案已公開(kāi)如上，但其并不僅僅限于說(shuō)明書(shū)和實(shí)施方式中所列運(yùn)用，它完全可以被適用于各種適合本發(fā)明的領(lǐng)域，對(duì)于熟悉本領(lǐng)域的人員而言，可容易地實(shí)現(xiàn)另外的修改，因此在不背離權(quán)利要求及等同范圍所限定的一般概念下，本發(fā)明并不限于特定的細(xì)節(jié)和這里示出與描述的圖例。

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